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Como é feita a produção in vitro de embriões bovinos?

Com o avanço da medicina veterinária, os rebanhos passaram a ser mais produtivos. Podemos atribuir esse crescimento ao intenso melhoramento genético a partir da seleção de características desejáveis ao manejo reprodutivo. A inseminação artificial em tempo fixo (IATF), a transferência de embriões (TE) e a produção in vitro de embriões bovinos (PIV).

A produção in vitro de embriões bovinos é uma biotécnica reprodutiva que possibilita a maximização do potencial genético do rebanho a partir do cruzamento de animais de alto valor. A vantagem dessa técnica é produzir descendentes de animais que não estejam fisicamente no mesmo lugar. Ou ainda, obter embriões até mesmo de animais que já morreram, mas deixaram material genético para reprodução.

Neste artigo, vamos apresentar alguns aspectos da PIV em bovinos. Continue a leitura e saiba como funciona e suas vantagens para a reprodução bovina!

O que é a produção in vitro de embriões bovinos?

A produção in vitro de embriões em bovinos é uma técnica reprodutiva importante que permite que o espermatozoide e o oócito interajam fora do trato reprodutivo da fêmea. Dessa forma, tem-se a formação de um novo indivíduo. Depois que houver a fertilização (FIV) e o cultivo in vitro do zigoto, o material será transferido para o útero de uma fêmea reprodutora (TE).

Essa biotécnica reprodutiva teve início de sua aplicação em bovinos na década de 80. No ano de 1982 nasceu o primeiro bezerro produzido por fecundação in vitro nos Estados Unidos. Já no Brasil, os primeiros indivíduos gerados pela PIV só foram gerados em 1994, utilizando oócitos maduros e sêmen descongelado.

Hoje a aplicação da técnica evoluiu muito no país tornando-o um dos maiores produtores de embriões bovinos do mundo.

Etapas da Produção in vitro de embriões bovinos

Para a realização da produção in vitro de embriões bovinos é preciso seguir algumas etapas. Confira cada uma delas a seguir!

Coleta de oócitos

A coleta de oócitos, que são as células reprodutivas da fêmea, pode ser feita de diferentes formas.

A primeira delas é post mortem, que é quando o veterinário faz a punção folicular nos ovários da fêmea para a obtenção das células. Essa é uma técnica muito utilizada quando o animal tem alto valor genético mas precisou ser abatido por causas diversas.

Quando a coleta de oócitos será feita com o animal vivo, utiliza-se a técnica da laparoscopia ou laparoscopia de flanco, ou seja, pequenas incisões semi-cirúrgicas no abdômen para a extração das células direto dos ovários.

Entretanto, uma técnica mais moderna e menos invasiva que é a aspiração folicular guiada pela ultrassonografia (OPU- Ovum Pick Up). Por meio dessa biotécnica, há uma produção maior e de melhor qualidade dos embriões bovinos. Para ter mais sucesso com a aspiração folicular pode-se aplicar um protocolo de superovulação.

Maturação

A maturação é a segunda etapa da PIV em bovinos é consiste em uma série de mudanças no citoplasma e no núcleo do oócito para que ele possa, então, ser fecundado.

Existem diversos sistemas de maturação para a produção in vitro de embriões bovinos. Mas, além do meio de cultura, é preciso dispor de uma estufa que mantenha a atmosfera gasosa e temperatura controlada e adequada. O período de maturação varia de 18 a 24 horas.

Depois da maturação nuclear,  é necessário que os oócitos adquiram progressivamente, durante a fase final de crescimento folicular, a capacidade de completar a maturação citoplasmática e, dessa forma, possam suportar o desenvolvimento embrionário. Afinal, é nessa fase que há diversas modificações ultra-estruturais, moleculares e bioquímicas do citoplasma e da membrana plasmática do oócito, que o permitem adquirir a competência para o desenvolvimento e o mecanismo enzimático relacionado ao bloqueio da polispermia.

Observa-se que a maioria dos oócitos coletados para PIV está incluso em pequenos folículos antrais e, desse modo, a capacitação é adquirida ao longo do desenvolvimento folicular devido às transformações ocorridas no oócito durante esse período, que o tornam apto a suportar as fases iniciais do desenvolvimento embrionário .

Fecundação

A fecundação se refere ao processo em que o espermatozoide entra em contato com o oócito, gerando o zigoto, que, posteriormente, se desenvolve até o estádio de blastocisto.

No processo in vivo, os espermatozóides precisam chegar até a tuba uterina para fecundar o oócito. Nesse trajeto, passa por transformações enzimáticas a partir da interação com substâncias uterinas permitindo uma hiperativação espermática.

Já na produção in vitro de embriões bovinos, é preciso que os meios e os protocolos usados  forneçam um ambiente adequado, sendo que esse deve permitir o metabolismo dos oócitos e células do cumulus, além de manter a função espermática eficiente para que ocorra a fecundação.

Transferência de embriões

Depois de passar pelas fases de maturação e fecundação, com a formação do zigoto,

este deverá passar por inúmeras divisões celulares ou clivagens até se constituir em blastocisto, estádio adequado para realização da transferência de embriões.

Na transferência, o embrião é coletado e será depositado no útero da fêmea receptora. É importante que o organismo desse animal esteja preparado para receber o material. Para isso, é importante que esteja no estágio reprodutivo adequado.

Vantagens da PIV em Bovinos

Como biotécnica, a produção in vitro de embriões bovinos apresenta diversas vantagens. As principais delas são:

  • possibilidade de gerar mais bezerros por ano;
  • seleção e aprimoramento genético dos filhotes gerados;
  • oportunidade de comercialização do material genético congelado de animais geneticamente superiores;
  • definição das características mais importantes para a produtividade e para a melhoria da caracterização do rebanho.
  • produção de embriões a partir de material de animais que já tenham morrido;
  • redução da incidência de problemas decorrentes da monta.

É importante saber que, para a correta aplicação dessa biotécnica é preciso investir em um equipamento de ultrassom veterinário de qualidade, pois ele será essencial para a coleta do material e diagnóstico de gestação. Além disso, por serem técnicas mais sofisticadas, é preciso ter um conhecimento profundo sobre reprodução bovina.

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